与老年性痴呆相关的载脂蛋白E基因型检测
与老年性痴呆相关的载脂蛋白E基因型检测
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INNO-LiPA ApoE | |||||||
一、临床背景
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载脂蛋白E(ApoE)是一种多态性蛋白,它可调节三磷酸甘油脂代谢,在脂蛋白中有其独特性。ApoE不仅可作为动脉粥样硬化高危指标,也可作为老年性痴呆(AD)检测指标之一。
载脂蛋白E等位基因,位于人类第19号染色体上,编码3个纯合子(表型为E2/2,E3/3,
E4/4),3个杂合子(表型为E3/2,E4/3,E4/2)。
在普通人群中,载脂蛋白E主要有三类同工型(ApoE2,ApoE3,ApoE4),其出现比率分别为8%,79%,13%,且这一比率在不同人群中差异很小。
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二、临床意义
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研究表明,ApoE4/4在正常人群及老年性痴呆(AD)患者中出现频率具有明显差异:在60周岁散发AD患者中,ApoE4/4出现频率高达37%(24—52%);而在同一年龄对照组中,ApoE4/4出现频率只有13%(5-19%)。另外,ApoE2同工型可降低患AD的危险性,并可推迟发病年龄。因此,可将ApoE基因型作为预测及诊断AD的重要检测指标之一。
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三、检测方法及原理
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INNO-LiPA ApoE基于反向探针杂交原理。经扩增后,被生物素标记的DNA与平行固定在薄膜检测条上的寡核苷酸探针进行杂交。杂交后,加入的标记有碱性磷酸酯酶的链霉抗生物素蛋白(链亲和素),与杂交产物上标记的生物素结合。加入显色底物NBT/BCIP孵育后,显现紫色或棕色,从而判断结果。
对ApoE DNA片段的扩增,应使用INNO-LiPA ApoE Amplification扩增试剂盒。
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四、检测特点
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1、操作简便,快速检测;
2、高准确性,高特异性;
3、通过对比卡,可用肉眼直
接判定结果。
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五、步骤及时间
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※扩增后总检测时间不超过2.5小时。 |